MEDDAILY.INFO
медицинская энциклопедия
ГлавнаяКарта сайта Контакты
 

Аналитические характеристики проточной цитофлюориметрии

фото Аналитические характеристики проточной цитофлюориметрии
Материалом для анализа методом проточной цитофлюориметрии могут служить любые микрочастицы, находящиеся в суспензии. Наиболее часто объектом исследования являются клетки крови и костного мозга. Также могут быть изучены клетки выпотных жидкостей, бронхоальвеолярного смыва, ликвора, гомогенизированные образцы тканей, клеточная суспензия, полученная при аспирационной тонкоигольной пункции лимфатических узлов и селезенки, а также хромосомы и бактерии. Возможно исследование цитокинов в сыворотке крови и тканях.

Предпочтительнее для исследования клеток крови и костного мозга использовать пробирки с калиевыми солями ЭДТА либо, при необходимости исследования функциональной активности клеток, гепарин. Существенным этапом подготовки проб для анализа является выделение из образца только тех клеток, которые интересуют исследователя. Первое, что может помешать анализу чистой лейкоцитарной популяции, — это эритроциты. С помощью лизирующих растворов либо выделения лейкоцитарной фракции на градиенте плотности происходит удаление эритроцитов из образца, и для анализа становятся доступны только ядросодержащие клетки крови или костного мозга. При исследовании костного мозга и гомогенизатов тканей важно, чтобы анализу не мешали конгломераты клеток соединительной ткани, — для этого используют специальные фильтры.


При иммунофенотипировании клеток костного мозга и периферической крови у больных с парапротеинемиями важно снизить неспецифическое связывание меченых антител белками плазмы крови, — для этого используют дополнительное отмывание клеток фосфатно-солевым буфером.

Метод проточной цитофлюориметрии позволяет одновременно оценивать до миллиона клеток. Позитивной считается область, насчитывающая не менее 50 событий. Таким образом, чувствительность метода проточной цитофлюориметрии — 1 на 20 000 клеток. Метод многоцветовой проточной цитометрии позволяет детектировать до 18 параметров клетки одновременно со скоростью до 10 000 тысяч клеток в секунду. Современные цитометры, как правило, оборудованы тремя и более фотоэлектронными умножителями (от 3 до 10), что позволяет в одном образце периферической крови проанализировать экспрессию основных маркеров практически всех клеток крови и костного мозга. Чем большее количество меченых моноклональных антител, связавшихся с клеткой, можно проанализировать в одном образце, тем выше специфичность метода. Все это привело к формированию многопараметрического анализа в цитометрий.

Оцените статью: (8 голосов)
3.5 5 8

Статьи из раздела Лабораторная диагностика на эту тему:
Возможности проточной цитометрии
Ограничения проточной цитометрии
Основы проточной цитофлюориметрии
Оценка клеточного звена иммунитета
Преимущества проточной цитофлюориметрии


Новые статьи

» Стронгилоидоз
Стронгилоидоз
Стронгилоидоз - хронически протекающий геогельминтоз с преимущественным поражением ЖКТ и общими аллергическими проявлениями. Основной источник заражения стронгилоидозом - больной человек. Некоторые... перейти
» Трихинеллез
Трихинеллез
Трихинеллез у человека - это острый зооноз с природной очаговостью, протекающий с лихорадкой, мышечными болями, отеком лица, кожными высыпаниями, высокой эозинофилией, а при тяжелом т... перейти
» Энтеробиоз
Энтеробиоз
Энтеробиоз - кишечный гельминтоз, вызываемый мелкой нематодой Enterobius vermicularis, со стертым и невыраженным течением, наиболее распространенный признак которого - перианальный зуд, возникающий на... перейти
» Аскаридоз
Аскаридоз
Аскаридоз - кишечный гельминтоз, вызываемый нематодой Ascaris lumbricoides, протекающий с поражением ЖКТ, интоксикацией, аллергическими реакциями. Аскаридоз - один из самых распространенных гельмин... перейти
» Альвеококкоз
Альвеококкоз
Альвеококкоз (Alveococcosis) - зоонозный биогельминтоз, вызываемый личиночной стадией цепней Echinococcus multilocularis, с хроническим прогрессирующим течением, развитием в печени и других органах мн... перейти
» Эхинококкоз
Эхинококкоз
Эхинококкоз (Echinococcosis) - зоонозный биогельминтоз, вызываемый личиночной стадией цепня Echinococcus granulosus, характеризуемый хроническим течением и развитием преимущественно в печени, реже в л... перейти