MEDDAILY.INFO
медицинская энциклопедия
ГлавнаяКарта сайта Контакты
 

Цитологическое исследование при заболеваниях органов дыхания

фото Цитологическое исследование при заболеваниях органов дыхания
ПОЛУЧЕНИЕ И ОБРАБОТКА МАТЕРИАЛА ДЛЯ ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
В зависимости от особенностей поражения верхних дыхательных путей применяют соскобы щеткой с поверхности поражения полости носа, глотки, гортани, трахеи, смывы физиологическим раствором, аспирационной пункцой тонкой иглой.

Основные методы цитологической диагностики при заболеваниях легких
• Исследование материала бронхоскопии (отпечатков с биоптата удаленной опухоли или кусочка ткани, соскобов щеткой, аспирата бронхиального секрета, трансбронхиальной аспирационной пункцией тонкой иглой, бронхоальвеолярного лаважа).
• Материал, полученный при катетеризации бронха без бронхоскопии. 
• Исследование мокроты.
• Трансторакальная аспирационная пункция тонкой иглой.
• Материал, полученный при медиастиноскопии, торакоскопии.
• Материал, полученный во время операции.
• Материал из внелегочных очагов (лимфатических узлов, выпотной жидкости).

В клинике основную группу составляют больные, у которых в легких рентгенологически определены очаговые изменения центральной или периферической локализации. Больным показана бронхоскопия, поэтому цитологическое исследование целесообразно начать с изучения материала бронхоскопии, хотя в рутинной практике нередко используют многократное цитологическое исследование мокроты.


В связи с тем что клетки в мокроте часто подвержены дегенеративным изменениям, интерпретация клеточного состава при цитологическом исследовании мокроты может быть затруднена, поэтому метод применяют в основном как скрининг при отсутствии данных о злокачественном поражении, а также при предположительном диагнозе опухоли у тяжелых, ослабленных больных. Принципиально в специализированных отделениях торакального профиля предпочтение отдают комплексному использованию инструментальных методов получения материала для цитологического исследования, в первую очередь во время бронхоскопии.

Таким образом, при бронхоскопии в случаях прямых признаков поражения главного, промежуточного, долевого бронха проводят биопсию с приготовлением отпечатков всех поверхностей биопсированного кусочка ткани; при поражении сегментарного и более мелких бронхов дополнительно получают соскоб щеткой и аспират бронхиального секрета; при периферическом поражении проводят катетеризацию соответствующего бронха с получением аспирата (три пробы).

При косвенных признаках перибронхиального поражения в пределах главного и промежуточного бронхов проводят соскоб щеткой, аспирацию бронхиального секрета и трансбронхиальную аспирационную пункцую тонкой иглой (по показаниям), а затем биопсию кусочка ткани с приготовлением отпечатков.


Показание к субкаринальной аспирационной пункцией тонкой иглой — признаки поражения паратрахеальных и бифуркационных лимфатических узлов, выявленные лучевыми и/или эндоскопическими методами.

Результативность исследования биопсированного кусочка ткани и его отпечатков по мере удаления пораженного участка бронха от бифуркации трахеи снижается, тогда как эффективность цитологического исследования соскоба щеткой и аспирата бронхиального секрета возрастает.

При центральной локализации поражения в случае отрицательного результата исследования бронхоскопического материала больному проводят пятикратное цитологическое исследование мокроты (спонтанной или индуцированной). При необходимости его проведения после бронхоскопии следует исключить возможность ошибочной трактовки реактивных изменений бронхиального эпителия, связанных с травматизацией слизистой оболочки бронха. Именно поэтому цитологическое исследование мокроты допустимо не ранее чем через сутки после предшествующей манипуляции.

При отрицательном результате изучения бронхоскопического материала, в том числе аспирата, полученного при катетеризации периферического бронха, через 1-2 сут повторно проводят катетеризацию бронха под местной анестезией без бронхоскопии; если она оказалась безуспешной, показана трансторакальная аспирационная пункция тонкой иглой, а при противопоказаниях больному назначают пятикратное цитологическое исследование мокроты.

Если на этапе обследования у больного обнаружены признаки распространения процесса (опухоли) за пределы легкого, цитологическое исследование начинают с изучения материала из внелегочных очагов: пунктатов лимфатических узлов, плевральной, асцитической жидкости, материала стернальной пункции (по показаниям) и др.

Бронхоальвеолярный лаваж
В группе больных с диффузным и диссеминированным поражением легких основной метод цитологической диагностики — изучение бронхоальвеолярного лаважа.


Он показан при альвеолите, протеинозе легкого и других неопухолевых поражениях как диагностическая и лечебная манипуляция.

Материал получают при фибробронхоскопии под общим наркозом. Подводя трубку бронхоскопа вплотную к устью сегментарного или субсегментарного бронха, шприцем (объемом 20 мл) в бронх вводят подогретый до 38 °С изотонический физиологический раствор с pH 7,2-7,4, который затем аспирируют (лаваж). Процедуру повторяют 5-6 раз, собирая каждую порцию лаважа в отдельную емкость из силиконированного стекла или пластмассы (для предотвращения прилипания макрофагальных элементов к стенкам). За исключением первой порции, обычно содержащей обильную примесь слизи и клеток бронхиального эпителия, остальные порции лаважа в ледяной бане направляют в лабораторию.

Первый этап исследования — изучение нативного материала бронхоальвеолярного лаважа. После измерения количества доставленного лаважа его отфильтровывают и используют для определения количества клеток и жизнеспособности макрофагов. Остальную часть материала центрифугируют в течение 10 мин при 1500 об./мин и из осадка центрифугата готовят мазки. Подсчет клеток проводят в камере Фукса-Розенталя.

Для подкрашивания ядер используют стандартную методику, как при подсчете лейкоцитов крови в камере или неокрашенных клеток, подобно подсчету клеток спинномозговой жидкости. Оценивают количество клеток в 1 мл лаважа и общее количество клеток во всей полученной порции; кроме того, определяют преобладающие клетки (макрофаги, лимфоциты, нейтрофилы). При преобладании лимфоцитов проводят иммунологическое, макрофагов — цитохимическое и электронно-микроскопическое исследования. Для оценки жизнеспособности макрофагов 5 капель отфильтрованного лаважа помещают на часовое стекло и добавляют 1 каплю 1% раствора трипанового синего, приготовленного на изотоническом растворе натрия хлорида.

Подсчет жизнеспособных клеток также проводят в камере Фукса-Розенталя, учитывая, что в погибших клетках ядро прокрашивается в сине-фиолетовый цвет, а в живых не окрашивается. Анализируют 100 клеток. Обычно у практически здоровых людей жизнеспособность макрофагов составляет 90-95%, снижаясь при некоторых заболеваниях.

Если бронхоальвеолярный лаваж исследуют не сразу, для сохранения жизнеспособности клеток лаваж необходимо хранить в ледяной бане с 50 мл раствора Хенкса (pH = 7,2-7,4). Мазки из осадка бронхоальвеолярного лаважа высушивают на воздухе и окрашивают в течение 5-7 мин по методу Романовского-Гимзы, Лейшмана, Паппенгейма. При цитологическом исследовании мазков определяют процентное соотношение различных клеток (цитограмма), подсчитывают в 200 клетках. При значительных различиях показателей в первой и второй сотне клеток подсчет продолжают (до 300-500 клеток). Большая примесь эритроцитов и клеток бронхиального эпителия (при подсчете их не учитывают) определяет непригодность бронхоальвеолярного лаважа для исследования.

У здоровых людей большинство клеток в бронхоальвеолярном лаваже составляют альвеолярные макрофаги (85-90%); обычно присутствуют единичные нейтрофилы (0-2%) и небольшое количество лимфоцитов (7-12%); у курильщиков количество нейтрофилов может достигать 4-5%. При различных заболеваниях легких, помимо изменения соотношений между основными клетками бронхоальвеолярного лаважа, находят другие клеточные элементы: эозинофилы, плазмоциты, тучные клетки (лаброциты).

По составу клеток выделяют несколько вариантов бронхоальвеолярного лаважа:
• лимфоцитарно-макрофагальный (саркоидоз, туберкулез, экзогенный аллергический альвеолит, альвеолярный протеиноз, пневмокониоз, коллагеновые болезни);
• нейтрофильно-макрофагальный (идиопатический фиброзирующий альвеолит, гранулематоз Вегенера, коллагенозы, пневмокониозы, инфекционные болезни, в том числе туберкулез);
• увеличение количества эозинофилов (экзогенный аллергический альвеолит, бронхиальная астма, аспергиллез, эозинофильная пневмония, аллергия на лекарственные препараты);
• макрофагальный вариант (у здоровых людей, часто у курильщиков, а также при различных заболеваниях легких).

Бронхоальвеолярный лаваж помогает отличить поражение, в котором преобладают лимфоциты (саркоидоз, гиперчувствительная пневмония, включая реакцию на лекарства, бериллиоз), от заболеваний с преобладанием нейтрофилов или макрофагов (идиопатический фиброзирующий альвеолит, гистиоцитоз X). Наличие гемосидерофагов делает возможной диагностику «немой» легочной геморрагии (за исключением острой фазы).

В зависимости от фазы и остроты процесса при одном и том же заболевании бронхоальвеолярным лаважом может быть лимфоцитарным или макрофагальным; наоборот, при разных заболеваниях иногда определяют схожую картину цитограммы. В этих случаях для установления диагноза необходимо использовать дополнительные методы (культуральное исследование — посев, окрашивание на микобактерии туберкулеза, цитохимические реакции, в сложных наблюдениях — электронную микроскопию).

При бронхоальвеолярном лаваже возможна идентификация грибов, пневмоцист, вирусов. С его помощью можно диагностировать оппортунистическую инфекцию у иммунокомпрометированных пациентов (при СПИДе и трансплантации органа), интерстициальные поражения легких, гранулематозы, гиперчувствительную пневмонию, лекарственно-индуцированную легочную токсичность, асбестоз, что делает этот метод особенно важным в современных условиях. Изучение бронхоальвеолярного лаважа используют для оценки отторжения трансплантата. Показатели диагностики периферического рака легких при его использовании близки к значениям при исследовании материала бронхоскопии (68,6% случаев). При отсутствии морфологического диагноза проводят цитологическое и гистологическое исследования во время торакомедиастиноскопии, торакотомии.



Новые статьи

» Стронгилоидоз
Стронгилоидоз
Стронгилоидоз - хронически протекающий геогельминтоз с преимущественным поражением ЖКТ и общими аллергическими проявлениями. Основной источник заражения стронгилоидозом - больной человек. Некоторые... перейти
» Трихинеллез
Трихинеллез
Трихинеллез у человека - это острый зооноз с природной очаговостью, протекающий с лихорадкой, мышечными болями, отеком лица, кожными высыпаниями, высокой эозинофилией, а при тяжелом т... перейти
» Энтеробиоз
Энтеробиоз
Энтеробиоз - кишечный гельминтоз, вызываемый мелкой нематодой Enterobius vermicularis, со стертым и невыраженным течением, наиболее распространенный признак которого - перианальный зуд, возникающий на... перейти
» Аскаридоз
Аскаридоз
Аскаридоз - кишечный гельминтоз, вызываемый нематодой Ascaris lumbricoides, протекающий с поражением ЖКТ, интоксикацией, аллергическими реакциями. Аскаридоз - один из самых распространенных гельмин... перейти
» Альвеококкоз
Альвеококкоз
Альвеококкоз (Alveococcosis) - зоонозный биогельминтоз, вызываемый личиночной стадией цепней Echinococcus multilocularis, с хроническим прогрессирующим течением, развитием в печени и других органах мн... перейти
» Эхинококкоз
Эхинококкоз
Эхинококкоз (Echinococcosis) - зоонозный биогельминтоз, вызываемый личиночной стадией цепня Echinococcus granulosus, характеризуемый хроническим течением и развитием преимущественно в печени, реже в л... перейти