MEDDAILY.INFO
медицинская энциклопедия
ГлавнаяКарта сайта Контакты
 

Анализ наркотических средств

фото Анализ наркотических средств
Химико-токсикологический анализ наркотических и других одурманивающих средств проводят в целях установления факта их присутствия в биологических объектах пациента, подозреваемого человека. Особенность химико-токсикологического анализа данного вида веществ в том, что он имеет два основных направления для исследования — судебно-правовой и клинический. Задачей первого является установление факта употребления запрещенного средства; ее решают с помощью клинической диагностики состояния наркотического опьянения с последующим химико-токсикологическим лабораторным исследованием. Клиническое направление анализа нацелено на диагностику, лечение и реабилитацию. В этом случае лабораторные методы исследования используют для контроля хода лечения (аналогия с химико-токсикологического анализа). Особое внимание в химико-токсикологическому анализу наркотических и других одурманивающих веществ уделяют моменту отбора пробы, который должен осуществляться под строгим контролем, с учетом возможности уничтожения пробы или ее фальсификации. По этим же причинам транспортировка пробы и ее хранение строго регламентируются.

В химико-токсикологическом анализом наркотических соединений различают два методических этапа: скрининг (предварительные исследования) и подтверждающие методы исследования, поскольку данное направление химико-токсикологического анализа — всегда ненаправленный анализ, так как человек, употребивший запрещенное средство, тщательно скрывает не только название использованного наркотического вещества, но и сам факт его употребления.


Именно поэтому на первом этапе необходимо добиваться получения минимума ложноотрицательных ответов (что зависит от чувствительности аналитических методов). На втором этапе с использованием методов исследования, обладающих равной или большей чувствительностью, чем методы первого этапа, но имеющих более высокую специфичность, получают определенную долю (до 15%) ложноположительных результатов. Получение ложноположительных результатов в анализе биологических объектов на содержание наркотических средств связано с падением специфичности используемого метода за счет перекрестных реакций. Например, при исследовании химико-токсикологического анализа идентификация каких-либо сильнодействующих средств затруднена употреблением кофе, чая, какао (кофеина и других ксантинов), присутствием в биологической пробе продуктов курения (никотина и его метаболитов), «безвредных» лекарственных средств, некоторых пищевых добавок, оказавшихся в организме.

Полученный в результате анализа отрицательный ответ может означать, что обследуемый:
• никогда не употреблял наркотических препаратов;
• употреблял наркотические вещества нерегулярно, а в последнее время не принимал их; 
• прекратил употребление наркотического средства для получения отрицательного результата анализа, зная, что будет ему подвергнут;
• разбавил образец во время отбора пробы, выпил большое количество жидкости или мочегонное средство перед тем, как у него должны забирать пробу;
• подменил пробу «чистой», принесенной с собой биологической жидкостью.

В связи с вышесказанным получение ложноотрицательных результатов связано со следующими моментами:
• снижением чувствительности используемого аналитического метода (чем выше чувствительность, тем меньше ложноотрицательных результатов);
• преднамеренной фальсификацией аналитической пробы;
• недостаточной квалификацией эксперта-аналитика;
• систематическими ошибками.

В свою очередь, положительный результат может означать, что обследуемый:
• принимает наркотические вещества постоянно;
• принимает наркотические средства нерегулярно;
• принимает наркотические препараты по рецепту врача или самостоятельно;
• находится под воздействием наркотического вещества во время отбора пробы.

Получение ложноположительных результатов связано прежде всего с падением специфичности аналитического метода и недостаточной квалификацией эксперта.


Надежности результатов аналитической диагностики достигают правильными организационными мероприятиями (приемом, хранением биологического материала, постоянным контролем работы оборудования, чистотой реагентов и др.), чувствительностью и специфичностью используемых методов, знанием природы вещества, способа его введения в организм, распределения, метаболизма, путей выведения, индивидуальных особенностей организма, грамотной интерпретацией полученных результатов с корректным заключением. При анализе с использованием различных хроматографических систем должны быть отмечены любые неопознанные пики, потому что они могут указывать на присутствие других летучих веществ в образце крови. Качественную гарантию достоверности результатов обеспечивает следующий прием. Известно, что точность анализа будет уменьшаться с увеличением концентрации этанола, поэтому чем выше концентрация, тем больше различия в результатах (результат «вчера-сегодня»). Соответственно качество анализа будет зависеть от правильной аналитической стратегии, например повторного анализа после длительных периодов хранения и др.

Правила отбора проб биологических материалов для анализа
Химико-токсикологический анализ биологических объектов на содержание наркотических веществ начинают с пробоотбора, где решают вопросы о типе объекта, необходимого для осуществления анализа, его количества, хранения, деления на аликвоты и т.


д., т. е. необходимых организационных мероприятий и технических манипуляций, обеспечивающих надежность исследования.

Биологическим объектом от живого человека могут служить смывы с рук и губ, полости рта, слюна, моча, волосы, ногти, потожировые выделения и в отдельных случаях (по предписанию!) кровь. Отбор пробы не должен доставлять обследуемому болевых или неприятных ощущений. Количество отобранного материала установлено приказом Минздрава РФ от 05.10.98 № 289 и соответствующими утвержденными методическими рекомендациями и справочными пособиями по обнаружению наркотических средств и, как правило, лимитировано чувствительностью предлагаемых для исследования аналитических методов. Эффективность анализа на содержание токсичного вещества может быть снижена манипулированием (с умыслом или без) с образцом, отбираемым для анализа (особенно у живых обследуемых). Образец может быть разбавлен, подменен или загрязнен. 

Информация о том, как замаскировать тест, имеет широкий доступ (от устного распространения до Интернета и популярных журналов). Кроме того, существует достаточное количество данных по премедикации, в которых показано, какими способами можно создать интерференцию в тестировании (например, наркотических веществ для получения ложноотрицательных результатов). Не исключен вариант выпуска подпольными синдикатами готовых форм, заведомо содержащих химические вещества, которые способны маскировать употребление запрещенного средства. Для противостояния возможным манипуляциям с образцом лаборатории должны обладать развитой системой защиты процедуры отбора пробы, чтобы обеспечить надежность как самого факта отбора, так и результатов тестирования. Эти мероприятия охватывают все этапы химико-токсикологического анализа, включая отбор проб, профподготовку, предварительные и подтверждающие методы анализа.

Подмена образца чаще всего происходит при отборе пробы у живых пациентов. Подмена донорского образца, изъятого у них, может быть легко обнаружена, так как «чистая» моча может быть взята у членов семьи, друзей и даже животных. Однако при замене мочи обследуемого на пробу, взятую у другого человека, существует очевидный риск того, что и в другой моче содержится какое-либо наркотическое вещество. Другой общий прием — замена образца жидкостью, схожей с мочой по цвету и консистенции. Подобная фальсификация может быть осуществлена заменой мочи разбавленным вином, пивом, смесью воды и других веществ, симулирующих мочу (яблочный сок, разбавленный чай). Учитывая, что температура отобранной биологической жидкости должна находиться в пределах 32-38 °С, подмененные образцы часто хранятся на теле подозреваемого в гибких контейнерах (презервативах, грелках). Доноры также умеют катетеризировать сами себя, чтобы заполнить мочой, свободной от наркотических средств, свой мочевой пузырь.

Один из наиболее общих приемов для изменения результатов тестирования — значительное разбавление исследуемого образца. Разбавление может уменьшить концентрацию токсичного вещества в образце по отношению к наиболее низкому уровню обнаружения.

Для разбавления используют различные приемы:
• введение большого количества воды в организм;
• использование предписанных медикаментозных средств или их антагонистов;
• введение других веществ, которые могут продуцировать диурез;
• добавление воды непосредственно в отобранный образец.

Хотя разбавление — эффективный прием, в лаборатории его можно контролировать соответствующими тестами, в частности экспресс-тестами «Мультичек», с помощью которых можно определять плотность мочи, ее pH и другие параметры. Вещества, способные вызвать повышенный диурез: классические диуретики, бензодиазепины, калийсохраняющие препараты, ингибиторы карбоангидразы, осмотические диуретики, алкоголь, аммония хлорид, кофеин, фитопрепараты. При отрицательном результате анализа на исследуемое вещество попутное обнаружение вышеуказанных веществ должно насторожить исследователя.

Для фальсификации пробы используют также ее загрязнение. Загрязнители, используемые подозреваемыми для сокрытия факта злоупотребления какими-либо веществами, можно разделить на две группы: in vivo и in vitro. Загрязнители, используемые in vivo, — соединения, предназначенные для создания интерференции во время анализа на подозреваемое вещество. Как правило, люди, использующие этот прием, прекрасно знают физико-химические основы методов, применяемых в химико-токсикологическом анализе, их возможности и недостатки. Так, можно отметить подкисление мочи, которое изменяет введение слабых оснований (фенциклидина, амфетаминов) за счет употребления больших количеств аскорбиновой кислоты (витамина С) или гиппуровой кислоты (подкисленных фруктовых соков). Подщелачивание мочи может быть вызвано употреблением больших количеств питьевой соды, которое приводит к увеличению элиминации слабых кислот (например, барбитуратов).

Использование известных схем лечения (большими дозами) также может изменить результат теста. Основные метаболиты ацетилсалициловой кислоты потенциально будут способствовать получению ложноотрицательных результатов, поскольку они интерферируют с измерением NADH, лежащего в основе многочисленных методов иммуноферментного анализа. Интерференция связана с увеличением молярного поглощения NADH при длине волны 340 нм. Подобной интерференции можно избежать, если использовать альтернативную длину волны.

Загрязнение образца in vitro достигается добавлением посторонних веществ. Хотя объективно присутствие загрязнителей приводит к ложноотрицательным результатам, окончательный эффект загрязнителей часто непредсказуем, могут наблюдаться ложноположительные результаты. Большинство загрязнителей добавляют с целью повлиять на иммунохимическую реакцию. Загрязнители могут изменить pH и/или ионную силу образца, повлиять на химическую структуру обнаруживаемого вещества, ингибировать связывание с антителами, интерферировать на этапе измерения. Это могут быть в первую очередь доступные бытовые химикалии — аммиак, алкоголь, сок лимона, перекись водорода, сода, отбеливатели и т. д.

Предотвращение загрязнения проб для анализа на наркотические и психотропные вещества
Для того чтобы предотвратить подмену образца, его разбавление и/или использование загрязнителей, при отборе образца следует выполнить несколько простых процедур.
• Необходимо проверить личность донора (документом с фотографией, пред-ставителем администрации или другим специалистом, имеющим право идентифицировать личность).
• Необходимо измерить температуру образца мочи (спустя 4 мин после отбора температура образца должна быть в интервале 32-38 °С).
• Вода туалетного бачка должна быть подкрашена (например, голубым цветом).
• Ограничить доступ обследуемого к воде, мылу, другим моющим, дезодорирующим средствам.
• Наблюдать (прямо или косвенно) за донором в момент отбора.
• Сохранять образец (маркировка).
• Донор должен снять верхнюю одежду, сдать личные вещи, вымыть и высушить руки перед сдачей анализа мочи, а также расписаться в рабочем журнале, что его образец не был заменен.

В случаях когда есть подозрение на подмену, разбавление или загрязнение образца, донор обязан сдать повторный анализ под непосредственным наблюдением обслуживающего персонала. Оба образца должны быть подвергнуты исследованию в лаборатории. Внимательный внешний осмотр отобранных биологических образцов может помочь в идентификации загрязнителей. Сильный запах жидкого мыла, отбеливателей, аммиака, уксуса или духов обычно проявляется в момент вскрытия контейнера. Ненормальный цвет, осадок — также важная характеристика возможного присутствия химических загрязнителей. Кроме того, детергенты образуют обильную пену при встряхивании. Необходимо знать бактериальный фон, изменение цвета, pH, запаха и другие обстоятельства. Идентичность потенциально разбавленных образцов необходимо оценивать по содержанию в моче креатинина, которое определяют на уровне 20 мг/100 мл, и его плотности. 

Предварительный анализ биологических образцов на наркотические и психотропные вещества
Для анализа наркотических веществ используют предварительные и доказательные методы. В качестве предварительных методов используют химические и биохимические тесты, иммунохимические методы, тонкослойной хроматографии. Все положительные результаты, полученные посредством одного или нескольких предварительных методов, должны быть обязательно подтверждены другими доказательными (подтверждающими) методами. Поскольку критерием положительного результата обнаружения наркотического вещества или его метаболита служит доказательство присутствия, подтверждающие методы должны обладать более высокими чувстви-тельностью, селективностью и специфичностью, чем предварительные.

Иммунохроматографический анализ. Тест-системы, основанные на методе иммунохроматографического анализа, позволяют в течение нескольких минут определить прием наркотических или психотропных веществ и их метаболитов в моче человека. Результаты такого скринингового исследования — предварительные. Тем не менее на предварительном этапе эта быстрая и простая диагностика, не требующая дополнительного оборудования, реактивов и специальных навыков, может быть очень полезна.

Принцип метода. Исследуемая моча за счет капиллярных сил мигрирует вдоль тест-полоски. При наличии в образце искомого наркотического вещества или его метаболитов в концентрации, превышающей пороговый уровень, исследуемые соединения вступают в реакцию со специфическими антителами, меченными частицами коллоидного золота, образуя комплекс «антиген-антитело». Этот комплекс вступает в реакцию конкурентного связывания с антигеном, иммобилизованным в тестовой зоне тест-полоски, при этом образования цветной полосы окрашивания в данной зоне не происходит. Такой результат имеет положительное значение. При отсутствии искомого наркотического или психотропного вещества или в случае, когда его концентрация меньше порогового значения, несвязанные меченые антитела связываются с иммобилизованным антигеном в тестовой зоне тест-полоски с образованием цветной полосы. Такой результат имеет отрицательное значение. В контрольной зоне тест-полоски цветная полоса образуется всегда и служит контролем, указывающим на правильность проведения процедуры теста и работоспособность его компонентов. Тест-полоски не предназначены для определения количественного уровня наркотических и психотропных веществ.

Сбор и подготовка образцов моги. Свежие пробы мочи нужно собирать в чистые пластиковые или стеклянные контейнеры, не использованные ранее для сбора мочи и не содержащие консервантов. Пробы можно исследовать немедленно или хранить в холодильнике (+2-8 °С) сроком до 48 ч. Для более длительного хранения пробы мочи замораживают при температуре -20 °С или более низкой. Все компоненты теста и образца мочи перед проведением анализа должны быть согреты до комнатной температуры.

Интерпретация результатов. Выявление двух полос розового цвета любой четкости и интенсивности окраски в тестовой и контрольной зоне свидетельствует, что в анализируемом образце мочи соответствующее наркотическое или психотропное вещество отсутствует или его концентрация ниже порогового значения. Выявление в контрольной зоне одной полосы розового цвета любой четкости и интенсивности и полное отсутствие второй полосы в тестовой зоне свидетельствует о наличии в анализируемом образце мочи соответствующего наркотического или психотропного вещества.

Если в течение 5 мин полосы не выявляются или появляется полоса на уровне тестовой зоны, результат оценивать нельзя, необходимо повторить тестирование с помощью новой тест-полоски. Положительный результат исследования, полученный с помощью тест-полосок, далеко не всегда свидетельствует об употреблении наркотических и психотропных веществ и не всегда в 100% случаев подтверждается другими специфическими методами.

Ввиду высокой чувствительности иммунохимических методов следует осторожно подходить к оценке и интерпретации полученных результатов при анализе образцов с крайне малым содержанием наркотических веществ и возможным влиянием пищевых добавок и общедоступных распространенных «безобидных» лекарственных средств. Так, при умеренном (обычном) употреблении кондитерских изделий с маком иммунохимические методы анализа дают положительный результат на опиаты образца мочи, собранной спустя 1-8 ч после употребления. При анализе методом обнаруживают морфин в следовых количествах. А при однократном приеме валокордина в дозе 1 мл (содержащего 20 мг фенобарбитала) возможно срабатывание иммунохимических тестов и наборов на барбитураты даже через 5-7 сут после употребления. Тест-полоска на каннабиноиды может дать ложноположительный результат, если в образце мочи в относительно больших количествах содержится папаверин с дибазолом.

Прием терапевтических доз лекарственных препаратов барбитуратов, бензодиазепинов может дать положительный результат анализа тест-системой, но это не свидетельствует о немедицинском использовании указанных веществ для одурманивания. Именно поэтому положительный результат без дополнительного исследования другими методами имеет только предварительное значение, интерпретировать его может только специалист, особенно для дифференцирования злоупотребления с целью наркотического или одурманивающего эффекта и лекарственного употребления.

Разработан новый метод определения скрытых форм наркомании, в основе которого — иммуноферментный анализ наличия антител к наркотическим веществам в сыворотке крови. Антитела к ним определяют, даже если испытуемый воздерживался от употребления наркотиков более недели, поскольку они циркулируют в кровеносном русле после последнего употребления до 2-3 мес. Разработаны наборы для определения антител в крови к опиатам, каннабиноидам, амфетаминам.

Оцените статью: (15 голосов)
4 5 15

Статьи из раздела Лабораторная диагностика на эту тему:
Алгоритм пренатального мониторинга беременности
Механизм взаиморегуляции в системе «мать - плацента - плод»
Мониторинг беременности
Регуляции метаболизма организмов матери и плода
Физико - химические методы исследования


Новые статьи

» Стронгилоидоз
Стронгилоидоз
Стронгилоидоз - хронически протекающий геогельминтоз с преимущественным поражением ЖКТ и общими аллергическими проявлениями. Основной источник заражения стронгилоидозом - больной человек. Некоторые... перейти
» Трихинеллез
Трихинеллез
Трихинеллез у человека - это острый зооноз с природной очаговостью, протекающий с лихорадкой, мышечными болями, отеком лица, кожными высыпаниями, высокой эозинофилией, а при тяжелом т... перейти
» Энтеробиоз
Энтеробиоз
Энтеробиоз - кишечный гельминтоз, вызываемый мелкой нематодой Enterobius vermicularis, со стертым и невыраженным течением, наиболее распространенный признак которого - перианальный зуд, возникающий на... перейти
» Аскаридоз
Аскаридоз
Аскаридоз - кишечный гельминтоз, вызываемый нематодой Ascaris lumbricoides, протекающий с поражением ЖКТ, интоксикацией, аллергическими реакциями. Аскаридоз - один из самых распространенных гельмин... перейти
» Альвеококкоз
Альвеококкоз
Альвеококкоз (Alveococcosis) - зоонозный биогельминтоз, вызываемый личиночной стадией цепней Echinococcus multilocularis, с хроническим прогрессирующим течением, развитием в печени и других органах мн... перейти
» Эхинококкоз
Эхинококкоз
Эхинококкоз (Echinococcosis) - зоонозный биогельминтоз, вызываемый личиночной стадией цепня Echinococcus granulosus, характеризуемый хроническим течением и развитием преимущественно в печени, реже в л... перейти